Bidang keilmuan biologi molekuler saat ini telah “menginvasi” semua lini kehidupan. Hampir semua bidang ilmu tidak dapat terlepas darinya, mulai dari Taksonomi, Biologi, Kelautan, Perikanan, Pertanian, Kehutanan, Budidaya, bahkan hingga Forensik dan Savetyfood pun tak bisa lepas darinya. Salah satu tahapan yang penting dalam analisis data Genetik/Molekuler adalah rekonstruksi pohon filogenetik. Pohon filogenetik dapat digunakan untuk menganalisis kedekatan suatu individu atau bisa juga untuk mencari fungsi gen/protein tertentu.
Berikut ini saya akan menguraikan secara ringkas bagaimana cara merekonstruksi (membentuk) pohon filogenetik dari data sequen DNA, mulai dari tahapan koreksi data hasil sequensing, penyususnan pohon filogenetik, hingga tahapan mengevaluasi hasilnya. Rekonstruk pohon filogenetik dapat dilakukan dengan menggunakan software MEGA atau BIOEDIT. Kali ini saya akan menguraikannya dengan menggunakan software MEGA 5.
MEGA 5 dapat digunakan untuk mencari kekerabatan spesies dengan melihat DNA nya dan ditentukan berdasarkan analisis filogeniknya.
Tampilan awal dari MEGA 5 seperti terlihat pada gambar 1
Gambar 1 Tampilan awal aplikasi MEGA 5
langkah selanjutnya adalah memilih menu “aligh” dilanjutkan dengan “edit/ build alingment”
Akan muncul kotak dialog “Select an options” selanjutnya pilih Create a new untuk mulai membuat halaman baru
selanjutnya akan muncul pilihan DNA atau protein sebagai datatype yang akan dianalisis keragaman filogeniknya, karena yang akan dianalisis adalah DNA maka pilih DNA
kemudian masukkan data yang akan dianalisis dengan cara Edit-Insert sequence from file- pilih file dari komputer
Misalkan aspergillus carbonarius, aspergillus niger, penicillium amagasakiense, penicillium, Talaromyces flavus
Tekan tombol Open- selanjunya akan muncul basa nitrogen dari masing-masing spesies
Kemudian disimpan dalam format MEGA dengan cara Klik Data-Export-MEGA format
Save as dengan mengetikkan nama file
Selanjutnya membuat pohon filogeniknya
Tampilan Filogenik
Sekian dan terimakasih